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Biacore是一种基于光学表面等离子共振原理(简称是SPR)的用于分子互作分析的常用方法 拓展:SPR是指当金属表面与介质中存在的光波相互作用时,能够在金属表面产生共振现象。
原理:B淋巴细胞在抗原的***下,能够分化、增殖形成具有针对这种抗原分泌特异性抗体的能力。B细胞的这种能力和量是有限的,不可能持续分化增殖下去,因此产生免疫球蛋白的能力也是极其微小的。
表面等离子波是在平行与金属/介质界面的方向上传播,而在垂直方向上是迅速衰减的,所以也可以说在垂直方向是局域的。这种情况下与纳米粒子是一样的,纳米粒子的等离子共振其实就是局域表面等离子共振。
能量从光子转移到表面等离子,入射光的大部分能量被表面等离子波吸收,使反射光的能量急剧减少。可以从左侧的反射光强响应曲线看到一个最小的尖峰,此时对应的入射光波长为共振波长,对应的入射角θ为SPR角。
动力学常数便可被确定。而非特异性结合和总折射指数移相等效应则可通过参照曲线减除功能予以驱除。表面等离子共振已经在商业化的检测仪器中应用。目前最广泛使用的是BiacoreLifeSciences公司生产的Biacore系列。
1、是真的,蛋白芯片检测目前已经应用于肿瘤筛查等健康领域,根据细胞代谢过程中产生一系列蛋白质因子变化,通过蛋白质芯片,将血清中的异常蛋白质因子筛选出来,由此反应出身体相关部位的健康状况。
2、蛋白芯片检测和传统的血清学肿瘤指标检测原理是一样的,只是方法的不同。
3、甲胎蛋白(AFP):在胎儿时期存在,出生后下降,正常人5微克/升,肝细胞发生癌变后明显升高,是诊断肝癌的常用指标。一般来说,AFP500微克/升L时,其诊断肝癌的阳性率可以达到70%~90%,特异性较好。
4、AFP是检测肝癌最好最常用的指标,70%以上的肝癌该指标呈阳性;另外加上广谱性肿瘤指标物CEA,又能对大多数常见恶性肿瘤进行早期预警。
生物芯片技术是通过缩微技术,根据分子间特异性地相互作用的原理,将生命科学领域中不连续的分析过程集成于硅芯片或玻璃芯片表面的微型生物化学分析系统,以实现对细胞、蛋白质、基因及其它生物组分的准确、快速、大信息量的检测。
目前基因芯片的制备主要***用三种方法:即光蚀刻合成法,压电印刷法,点样法。
通过对杂交信号的检测分析,得出样品的遗传信息(基因序列及表达的信息)。由于常用计算机硅芯片作为固相支持物,所以称为DNA芯片。根据芯片的制备方式可以将其分为两大类:原位合成芯片和DNA微集阵列(DNA microarray)。
在玻璃等硬质表面上直接合成的寡核苷酸探针阵列,与荧光标记的靶基因杂交进行检测。
DNA芯片技术主要包括四个主要步骤:芯片制备、样品制备、杂交反应和信号检测和结果分析。芯片制备-制备芯片主要以玻璃片或硅片为载体,***用原位合成和微矩阵的方法将寡核苷酸片段或cDNA作为探针按顺序排列在载体上。
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