简述pcr检测技术的临床应用（简述pcr实验技术的基本原理）

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本文目录一览：

• 1、PCR技术的广泛用途
• 2、请写出3-4种pcr技术及其应用。
• 3、PCR的应用
• 4、PCR的原理是什么,它有什么用途
• 5、PCR技术主要应用的领域是哪里?
• 6、pcr扩增目的基因的临床意义

PCR技术的广泛用途

1、首先经反转录酶的作用从RNA合成 cDNA，再以cDNA为模板，扩增合成目的片段。RT-PCR技术灵敏而且用途广泛，可用于检测细胞中基因表达水平，细胞中RNA病毒的含量和直接克隆特定基因的cDNA序列。

2、PCR就可以检测到。一般实验室也能检出10～100基因拷贝，而目前病原体抗原检测方法一般需要105－7个病原体才可检测到。PCR对病原体的检测解决了免疫学检测的“窗口期”问题，可判断疾病是否处于隐性或亚临床状态。

3、PCR技术我们一般人听之比较少 ，但应用中却是广泛存在 。如医学中用于细菌、病毒的检测 ，亲子的测定 ，遗传病的检测，法医证物的测定等等。

请写出3-4种pcr技术及其应用。

1、几种重要的PCR衍生技术 （一）逆转录 PCR技术 逆转录PCR（reverse transcription PCR，RT-PCR）是将RNA的逆转录反应和PCR反应联合应用的一种技术。

2、PCR反应的延伸温度一般选择在70～75℃之间，常用温度为72℃，过高的延伸温度不利于引物和模板的结合。PCR延伸反应的时间，可根据待扩增片段的长度而定，一般1Kb以内的DNA片段，延伸时间1min是足够 的。

3、qPCR已经成为目前临床基因扩增实验室接受程度最高的技术，在各类病毒、细菌等病原微生物的鉴定和基因定量检测、基因多态性分型、基因突变筛查、基因表达水平监控等多种临床实践中得到大量应用。

4、从基因组、质粒中，提取、扩增目标基因 定点突变 随机突变建立突变库 易错PCR Real Time PCR 实时定量PCR 定量分析 重叠延伸PCR可以用于两段基因的组装。

PCR的应用

荧光定量PCR用于对PCR产物实时监控 cDNA末端快速扩增技术 检测基因的表达 医学应用：检测细菌、病毒类疾病；诊断遗传疾病；诊断肿瘤；应用于法医物证学。

诊断遗传疾病；诊断肿瘤；应用于法医物证学。

可据此进行肿瘤早期诊断、分型、分期和预后判断；遗传病，PCR技术首次临床应用是检测镰状细胞和β-地中海贫血的基因突变。用FQ-PCR检测各种珠蛋白基因表达差异，是地中海贫血诊断的有效手段。

PCR的原理是什么,它有什么用途

1、PCR最有价值的应用领域就是对感染疾病的诊断。理论上，只要样本有一个病原体存在，PCR就可以检测到。在实验中发现，DNA在高温时也可以发生变性解链，当温度降低后又可以复性成为双链。

2、【答案】：（1）PCR技术的基本原理：类似于DNA的天然***过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。

3、原理是：提取组织或细胞中的总RNA，以其中的mRNA作为模板，***用Oligo（dT）或随机引物利用逆转录酶反转录成cDNA。再以cDNA为模板进行PCR扩增，而获得目的基因或检测基因表达。

4、原理 DNA的半保留***是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解旋成单链，在DNA聚合酶的参与下，根据碱基互补配对原则***成同样的两分子拷贝。

PCR技术主要应用的领域是哪里?

1、感染性疾病 PCR在医学检验学中最有价值的应用领域就是对感染性疾病的诊断。理论上，只要样本有一个病原体存在，PCR就可以检测到。

2、PCR技术主要用于基因工程学科方面的研究、技术开发等。在测序、构建新的DNA分子、序列比对等应用较多，因为PCR是很基本也是很重要的基因工程技术，所以应用非常广泛，几乎做基因的没有不用PCR的课题和项目。

3、在qPCR实验中，通常会加入一种荧光染料，这种染料在PCR反应中与扩增的DNA或RNA结合，产生荧光信号。通过检测荧光信号的强度，就可以推断出模板的数量。

4、PCR是聚合酶链反应的缩写，是一种基本的分子生物学技术，通常用于扩增DNA片段。通过PCR技术，可以在极小的DNA样本中扩增出数百万份***品。PCR技术广泛应用于基因组学、分子生物学、医学诊断、法医学等领域。

pcr扩增目的基因的临床意义

1、该技术主要用于：分析基因的转录产物、获取目的基因、合成cDNA探针、构建RNA高效转录系统。

2、pcr扩增产物的作用是可以用于进一步的研究。PCR反应完成目标DNA的扩增后，PCR产物可以用于进一步的研究。例如用于DNA测序、克隆、分析基因的功能和表达等。

3、PCR最有价值的应用领域就是对感染疾病的诊断。理论上，只要样本有一个病原体存在，PCR就可以检测到。在实验中发现，DNA在高温时也可以发生变性解链，当温度降低后又可以复性成为双链。

4、大量扩增目标基因片段，用于基因工程或检测。如：怀疑牛肉中掺杂马肉，就可以用马基因的特异性引物对样品进行PCR，经扩增后如果能够得到响应条带，就可证实。方法简单易行，相比其它方法有优越性。

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