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1、单糖具有旋光性,在水溶液中有变旋现象发生,但多糖在水溶液中不呈变旋作用。也可衍生化后***用气相色谱或HPIC的方法对个单糖进行定性定量分析。
2、方法名称:云芝-多糖的测定-中和滴定法应用范围:该方法***用中和滴定法测定云芝中多糖的含量。该方法适用于多孔菌科真菌彩绒革盖菌Coriolus versicolor (L.ex Fr.)Quel的干燥子实体。方法原理:分别测得供试品中总糖及单糖的含量,用总糖含量减去单糖含量即为多糖含量。
3、研究表明,相同糖苷键在酸水解和乙酰解中的速度是不同的。乙酰解是酸水解的一种有用的补充,多糖可从这两种不同的方法中获得不同的片段,从不同的角度获得多糖的结构信息。
4、一)苯酚法测定可溶性糖 【实验原理】植物体内的可溶性糖主要是指能溶于水及乙醇的单糖和寡聚糖。
1、多糖是生物体中常见的一类大分子化合物,由许多简单的单糖分子通过糖苷键连接而成。GC是多糖的一种表征方法,全称为高效液相色谱。多糖GC是指利用高效液相色谱技术对多种多糖进行定性和定量分析的方法。多糖GC技术可以用于多种生物样品的糖的分析,如精细分析植物多糖、细菌多糖、动物多糖和海洋多糖。
2、灵芝粗多糖是灵芝孢子最主要的有效成分。以粗多糖的检测方法为例进行说明。
3、苯酚法测定可溶性糖的原理是:糖在浓硫酸作用下,脱水生成的糠醛或羟甲基糠醛能与苯酚缩合成一种橙红色化合物,在10-100mg范围内其颜色深浅与糖的含量成正比,且在485nm波长下有最大吸收峰,故可用比色法在此波长下测定。
1、第三步则要除去这些杂质,对于无机盐及低分子量的有机物质可用透析法、离子交换树脂或凝胶过滤法除去;对于大分子杂质可用酶消化 (如蛋白酶.木质素酶) ,乙醇或丙酮等溶剂沉淀法或金属络合物法。
2、还原糖的鉴定:向试管内注入2ml待测组织样液。向试管内注入1ml菲林试剂(甲液和乙液混合均匀后再注入)。将试管放入盛有50-65摄氏度温水的大烧杯中加热约2分钟。观察试管中出现的颜色变化。脂肪的鉴定:方法一:向待测组织样液中滴加3滴苏丹三染液,观察样液被染色的情况。
3、-二硝基水杨酸比色法 原理:还原糖在碱性条件下,自由的醛基酮基会变成非常活泼的希二同类不具有醇,后者具有极强还原性可以使3,5二硝基水杨酸还原。酮糖具有还原性,而普通的同类不具有,故无还原3,5二硝基水杨酸的能力。
4、测定糖类的基础是化学分析方法。最常用的方法是葡萄糖氧化法和硝酸银法。葡萄糖氧化法是指将葡萄糖与氧气反应生成葡萄糖酸,再通过加热反应,生成Fehling试剂可以检测到的红色沉淀。而硝酸银法是指将糖溶液与硝酸银反应生成可检测到的白色沉淀。除了化学分析方法外,还有生物传感技术可以用于检测糖类的含量。
1、材料的选取:含脂肪量越高的组织越好,如花生的子叶。步骤:制作切片(切片越薄越好)将最薄的花生切片放在载玻片中央。染色(滴苏丹Ⅲ染液2~3滴切片上→2~3min后吸去染液→滴体积分数50%的酒精洗去浮色→吸去多余的酒精)。制作装片(滴1~2滴清水于材料切片上→盖上盖玻片)。
2、第一注意双缩脲试剂与斐林试剂二者中硫酸铜溶液浓度不同。第二:这两种试剂使用方法。第三;斐林试剂现配现用,而且检验还原糖时要水浴加热 第四:蛋白质检测时,先加氢氧化钠制造碱性环境,后加硫酸铜3到4滴,不能过量。
3、实验二 检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质 实验原理 某些化学试剂能使生物组织中的有关有机化合物,产生特定的颜色反应。 可溶性还原糖(如葡萄糖、果糖、麦芽糖)与斐林试剂发生作用,可生成砖红色的Cu 2O沉淀。
1、在大黄的检验中,通常会对这些蒽醌类成分进行光谱分析,如紫外-可见光谱或高效液相色谱(HPLC),以确定其存在和含量。这种分析有助于区分大黄与其他含有相似成分的植物。 黄芪的化学检验则侧重于其含有的黄酮类、皂苷类和多糖类化合物。
2、大黄主要含有蒽醌等成分,这是一种具有特定波长的色素,可以作为大黄的主要鉴别特征。对其蒽醌类成分进行测定,可以有效的区分大黄与其他植物。对于黄芪,它主要含有的成分是黄酮、皂苷和多糖等,这些成分也可以作为其独特的化学标志物。对其黄酮、皂苷和多糖等进行定性和定量分析,可以有效的确定黄芪的身份。
3、是利用黄酮类化合物与混入杂质极性不同。黄酮类化合物与混入杂质在极性上存在差异,因此可以通过酸碱法进行分离。在酸性条件下,黄酮类化合物表现出酸性,可以与碱反应生成盐,而杂质则不被反应。通过调节pH值,可以使黄酮类化合物以盐的形式沉淀出来,从而达到分离的目的。
4、紫外可见分光光度法是利用物质吸收光的特性来测定样品中所含物质浓度的方法。而菁茶中总黄酮在紫外光区域(200-400nm)有吸收峰,可用紫外光谱仪检测其吸收强度。常见的总黄酮成分如槲皮素、芦丁、异鼠李素等在350-370nm处有吸收峰,可以根据这些吸收峰的特点进行测定。
5、- 阿魏酸醇酸法:用于检测黄酮类化合物中是否含有酮基和酚羟基。- 铝酞法:适用于检测黄酮类化合物中含有的羟基。- 氨水合铜离子法:可检测黄酮类化合物中酮基或酚羟基的存在。 **醌类化合物**的检识技术:- 邻苯二酚法:用于检测醌类化合物中含有的酮基和酚羟基。
6、主要包含两种显色方式,一种是NaNO2-A1(NO3)3-NaOH比色法,即在测定过程中依次加入NaNOA(NO3)NaOH溶液,产生稳定的红色化合物在(505±5)m处进行比色测定含量,此法是目前应用最为广泛的测定黄酮类化合物的方法,可以有效地排除多糖和皂苷的干扰。
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